CRO受託試験受託アッセイ

Evercyte社

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2011年にオーストリアのウィーンで設立されたBiotechです。ヒトテロメア逆転写酵素（hTERT）遺伝子による不死化技術に強みを持っており、hTERT不死化細胞株の販売、受託アッセイサービス、及び細胞株受託作製サービスを提供しています。また、尿サンプルからiPS細胞を樹立するサービスや、不死化細胞をホストとしたエクソソームの受託製造サービスを行っています。

Evercyte社では不死化細胞株を利用して下記の受託アッセイサービスを提供しております。
同細胞株は、初代培養細胞の持つ生体に近い性質をほぼ維持しており、連続培養が可能です。同社では初代培養細胞で実現できない各種in vitroアッセイサービスを提供しています。

老化研究向けサービス
細胞毒性試験
サイトカイン
ターゲティング
抗線維化
血管新生
創傷治癒試験

サービスカテゴリーをクリックすると、下部にコンテンツが表示されます。その他のアッセイをご希望の方は、お問い合わせください。

老化研究向けサービス

Senolytic DrugやSenomorphic Drugは、生体にとって有害な老化細胞を体内から除去・阻害することでがんを含めた様々な加齢性疾患の発症を遅延させる治療薬の開発へと発展する可能性が期待されるものです。Evercyte社では、in vitroモデルを使用したスクリーニングを始めとした老化をベースとした創薬研究のサポートを実施します。

皮膚	ヒト成人皮膚線維芽細胞(HDF/TERT164) ヒト包皮線維芽細胞(fHDF/TERT166) ヒトリンパ管皮膚微小血管内皮細胞(HDMVEC/TERT164-B)
肺	ヒト肺線維芽細胞(LF/TERT309) ヒト気管支上皮細胞(HBEC-3KT)
血管	ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC/TERT2) ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC/TERT66) ヒトリンパ管皮膚微小血管内皮細胞(HDMVEC/TERT164-B)
腎臓	ヒト腎近位尿細管上皮細胞(RPTEC/TERT1)
間葉系幹細胞	ヒト脂肪由来間葉系幹細胞(ASC/TERT1) ヒト脂肪由来間葉系幹細胞(ASC/TERT300) ヒト骨髄由来間葉系幹細胞(BM-MSC/TERT292-B) ヒト胎盤絨毛膜版由来間葉系幹細胞(CP-MSC/TERT308) ヒト羊膜由来間葉系幹細胞(RA-MSC/TERT308) ヒト胎盤羊膜由来間葉系幹細胞(P-MSC/TERT308)

*リストにない細胞についてもご相談いただけます。お問い合わせください。

老化モデル

・複製老化まで細胞を培養した老化モデル
・Doxiolbicin処理した老化誘導モデル (1)

老化表現型の確認

・細胞形態の確認 (2)
・SA-β Galactosidase　アッセイ
・老化マーカー（ex: p16, p21) の分析
・BrdUの取り込み試験による細胞周期の進行
・培養上清中のII6, II8, MCP-1など老化関連分泌表現型(SASP)の変化
・miRNAプロファイリング
・almarBlueアッセイ

*一部試験は姉妹会社のTAmiRNA社での実施となります

*リストにない試験についてもご相談いただけます

コントロールとして利用可能な細胞

・活発な増殖期にある細胞
・コンフルエントまで培養した静止細胞

(1) ヒト正常細胞における老化誘導

Doxisolbicin処理した細胞の老化表現型をトランスクリプトーム解析によって確認。
静止細胞(QUI：黒)と比較して、Senescence-associated secretory phenotype（SASP)であるp21の優位な増加（赤）が分析されたすべての細胞種で確認。

(2) 老化誘導した細胞の形態確認

Doxisolbicin処理したヒト肺線維芽細胞（右）は老化細胞に典型的な平坦化された多角形態となる事を確認。早期継代のサブコンフルエントな細胞（左）と比べて、形態に差がみられる。

事例

化合物の老化細胞除去活性試験

静止および老化ヒト皮膚線維芽細胞を化合物で処理し、細胞生存率を3日後に測定。
これにより、老化細胞に対する潜在的な老化細胞破壊活性 (青) と、増殖停止(静止)細胞に対する細胞傷害活性 (灰色) を持つ化合物を特定可能です。

血管新生

血管新生は、腫瘍増殖、乾癬、黄斑変性症などの疾患において重要な役割を果た生理的機能です。また、血管新生は組織再生にも関与しており、この機能を阻害または賦活する薬剤の探索は、ますます重要になっています。Evercyte社では、新生血管試験に用いることが可能なin vitroモデルをご提供するとともに受託試験についても承ります。

利用可能な細胞

血管	ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC/TERT2) ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC/TERT66)

*リストにない細胞についてもご相談いただけます。お問い合わせください。

アッセイのセットアップ

HUVEC/TERT2細胞をMatrigel マトリックス上に播種し、細管様構造の形成をモニタリングします。HUVEC/TERT2 細胞はMatrigelにて3D スフェロイドとして増殖させることができます。これらのスフェロイドを血管内皮増殖因子（VEGF）で処理すると、血管新生の誘導を示すスプラウト（芽）が形成されます。形成されるスプラウトの長さと数を測定し、血管新生促進活性または抗血管形成活性を持つ化合物の同定を行います。
また、HUVEC/TERT2細胞をマルチウェルプレートに播種した後、試験化合物で処理し、細胞増殖を測定することにより、血管新生に関与する化合物のFast Screeningを行います。

事例

臍帯静脈内皮細胞から形成したスフェロイドからのスプラウト形成試験

ヒト臍帯静脈内皮細胞 ( HUVEC/TERT2 ) をハンギングドロップ法で増殖させると、コラーゲンマトリックスに埋め込むことができる3D スフェロイドを形成します。
これらのスフェロイドを血管内皮増殖因子 (VEGF) で処理すると、スプラウトの形成が誘導されます。また、VEGFとシクロスポリン A (CSA) の存在下での共培養は、濃度依存的にスプラウト形成を大幅に減少させます。

詳細はEvercyteのWebサイトをご参照ください

フォームによるお問い合わせはこちら

皮膚	ヒト皮膚ケラチノサイト（角化細胞）(NHEK/SVTERT3-5) ヒト成人皮膚線維芽細胞(HDF/TERT164) ヒト包皮線維芽細胞(fHDF/TERT166) ヒトリンパ管皮膚微小血管内皮細胞(HDMVEC/TERT164-B)
角膜	ヒト角膜上皮細胞(hTCEpi)
肺	ヒト肺線維芽細胞(LF/TERT309) ヒト気管支上皮細胞(HBEC-3KT)
血管	ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC/TERT2) ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC/TERT66) ヒトリンパ管皮膚微小血管内皮細胞(HDMVEC/TERT164-B)
胎盤	ヒト胎盤絨毛膜版由来間葉系幹細胞(CP-MSC/TERT308) ヒト羊膜由来間葉系幹細胞(RA-MSC/TERT308) ヒト胎盤羊膜由来間葉系幹細胞(P-MSC/TERT308)

皮膚	ヒト包皮線維芽細胞(fHDF/TERT166)
肺	ヒト肺線維芽細胞(LF/TERT309)

皮膚	ヒト包皮線維芽細胞(fHDF/TERT166) ヒト成人皮膚線維芽細胞(HDF/TERT164)
肺	ヒト肺線維芽細胞(LF/TERT309)

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