真菌株編

真菌株や酵母株を水和するためにはどうしたらよいですか?

酵母やカビは、バクテリアのように液体培地へ直接播種して膨潤されることを嫌います。凍結乾燥状態の酵母やカビを起眠する適切な方法とは、滅菌水を加えて膨潤させることです。ATCCでは、パスツールピペットで、バッチバイアル（内側と外側のある二重バイアルの類です）もしくは血清バイアル（金属製キャップのバイアルです）の中に約0.3ml容量の水を入れて膨潤しています。その後、ピペットで全量を吸い上げ、5mlの滅菌水を含む試験管に移し入れています。

膨潤された酵母やカビは少なくとも数時間（一晩でも充分です）静置してから、液体培地や寒天培地へ移してください。膨潤された微生物の混和液は、株が生育したことが確認できるようになるまで、しばらく保管しておいてください。コンタミしていなければ、冷蔵庫で数日間保管が可能です。もしコンタミさせてしまった場合には、段階希釈によりシングルコロニーを吊り上げることで目的の微生物を回収することができます。

御利用の微生物の生育と培養に関する更なる情報は、下記資料を参照いただくことをお勧めします。

著者：D. Smith and A.H.S. Onions
タイトル：The Preservation and Maintenance of Living Fungi (CAB International)
出版年：1994

著者：O.D. Dhingra and J.B. Sinclair
タイトル：Basic Plant Pathology Methods (CRC Press)
出版年：1995

What is the best way to rehydrate fungi and yeasts?

Yeasts and other fungi don't like being revived from a lyophilized condition directly into broth the way that bacteria do. The proper way to recover yeasts and other fungi from a lyophilized condition is to add sterile distilled water. We use a Pasteur pipette to add approximately 0.3 ml water to the inner vial of a batch vial (that's the kind with inner and outer glass vials) or to a serum vial (the kind with a metal cap). Then we draw up the entire contents into the pipette and transfer to a test tube with about 5 ml sterile water .

Let the yeast or fungus rehydrate for at least a couple hours (overnight is not too long) before transferring to broth or solid agar. Save the mixture of lyophilized material and water for a while, until you know you have growth. If not contaminated, it will keep several days in a refrigerator. If you do subsequently contaminate your culture, you can recover the desired microorganism by serial dilution and picking single colonies.

If you need more information on the care and feeding of your culture, ATCC recommends The Preservation and Maintenance of Living Fungi by D. Smith and A.H.S. Onions (CAB International, 1994), or Basic Plant Pathology Methods by O.D. Dhingra and J.B. Sinclair (CRC Press, 1995).

菌株の成育が停止した後、再び成育を促すためにはどうしたらよいですか?

培地、光、年齢、継代数などの様々な要素が胞子形成能に影響を与えています。これまでに胞子形成が認められていた多くの株において、年齢や継代の影響により胞子形成能が失われています。この現象は、特に糸状不完全菌類の暗色線菌科（dematiaceous hyphomycetes）である、Alternaria, Helminthosporium, Drechslera, Curvularia などで示されています。これらの株の胞子形成能は紫外線に近い黒色光の下で12時間光をあて、12時間光を消す、というサイクルを繰り返して培養することで回復します。新しく調整した株であれば胞子産生には最適ですが、可能であれば胞子は凍結乾燥、もしくは液体窒素条件下で数週間もしくはそれ以上保存しておくようにしてください。

How can fungal cultures be encouraged to sporulate again after they have stopped?

Many factors affect a culture's ability to sporulate, including medium, light, age and number of transfers. With age and/or transferring, many formerly sporulating cultures simply stop producing spores. This is especially true of many of the dematiaceous hyphomycetes such as Alternaria, Helminthosporium, Drechslera, and Curvularia. Sporulation of these cultures can be aided by growing the cultures under a black light (near UV) that alternates with a 12-hours-on and 12-hours-off cycle. Freshly isolated material is best for spore production, but to keep spores for several weeks or longer, freeze-drying or liquid nitrogen storage is recommended.

YM Agar(ATCC Medium 200)の培地組成を教えてください。

malt extract (3 mg), yeast extract (3 mg), glucose (10 g), peptone (5 g), agar (15 g)を加え、YM寒天培地1Lを調整してください。

What is the formulation for YM Agar (ATCC Medium 200)?

One liter of YM Agar contains malt extract (3 mg), yeast extract (3 mg), glucose (10 g), peptone (5 g), and agar (15 g).

菌株の凍結保存はどのように行ったらよいですか?

ATCCでは、凍結されたカビ培養液は液体窒素の気層中で保存していただくことを推奨いたします。もし液体窒素がなければ、-70℃で1週間以内の保存は可能です。-20℃では絶対に保存しないでください。

How should I store frozen fungal cultures from ATCC?

We recommend that frozen fungal cultures be stored in the vapor phase of liquid nitrogen. If liquid nitrogen storage is not available, vials may be stored at -70^oC for no longer than one week. Do not store cultures at -20^oC.

ATCCのMycology株、及びBotany株をATCCへ寄託するためにはどうしたらよいですか?

ご質問等は、ATCCウエブサイトのMake a Depositよりお問い合わせください。

How do I deposit a strain into the Mycology and Botany?

See our Make a Deposit to inquire about depositing materials at ATCC.